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MHC四聚体常见问题

Q:什么是MHC四聚体?

AMHC四聚体(MHC Tetramer是一类免疫学试剂,由四个主要组织相容性复合体(Major Histocompatibility ComplexMHC)与抗原肽结合的单体分子组成,并标记有荧光,用于T细胞免疫分析MHC 四聚体检测。

Q:为什么选择MHC四聚体?

AT细胞在肿瘤、病毒、细菌、寄生虫、移植组织、过敏原、甚至自身抗原的适应性免疫应答中都发挥着重要的调节作用。大部分T淋巴细胞在其细胞表面表达单一的、高度特异性的抗原受体(TCR),与MHC-抗原肽复合物相结合并识别其中特异的抗原肽,启动获得性/特异性免疫应答机制,比如T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫。

由于TCR MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低,半衰期短,相互结合后容易快速脱落,重组的可溶性MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原特异性的T细胞检测。

MHC四聚体技术作为T细胞免疫应答定量的金标准可通过流式细胞术快速、简便的对抗原特异性T细胞(antigen-specific T cells)进行定性或定量分析,与其他应用于T细胞检测的方法如胞内细胞因子染色法(ICS)、酶联免疫斑点检测法(ELISPOT)等相比, MHC四聚体技术具有高灵敏度、高特异性、定量分析简便且重复性高等优点

QMHC四聚体在肿瘤和病毒性疾病方面有哪些研究?

AMHC四聚体技术可应用于癌症及病毒性疾病治疗的基础和临床研究。目前已用于乳腺癌、黑色素瘤、结肠癌、肺癌、宫颈癌和乙型肝炎、流感等免疫治疗方面的研究:

(1)准确和有效地监测患者的抗原特异性T细胞数量;

(2)识别特定的抗原;

(3)用于开发疫苗––在未接种疫苗和接种疫苗的患者中监测抗原特异性T细胞;

(4)为研究人员提供数据,通过癌症疫苗的自然诱导或刺激,可反映个体对特定肿瘤抗原的免疫应答状态;

(5) 结合ELISPOT技术评估乙型肝炎患者免疫治疗效果。

Q:目前常用于分析MHC分子与抗原肽亲和力的软件?

ASYFPEITHIhttp://www.syfpeithi.com/

Q:好芝生物科技提供的MHC四聚体规格及蛋白含量有多少?

A我们提供的MHC四聚体规格是100 tests,其MHC总蛋白含量为25ug

QMHC四聚体产品应该如何保存?

A MHC四聚体试剂的储存条件:2-8℃避光保存,切忌冷冻保存。

Q:关于四聚体的荧光标记,请问除了APCPE标记外,有FITC标记的吗?

A由于FITC标记的分子太小,实验的效果不好,所以暂不提供FITC标记。

Q MHC四聚体试剂实验中一般要求的细胞数量是多少?

A对于新鲜的外周血单核细胞、淋巴细胞、脾细胞,通常建议每个染色样品细胞总数为1-2 ×106;而对于细胞克隆或者CTL细胞系,每个样品细胞总数可减低为2×105。当针对细胞克隆染色时,建议选取具有不同特异性的其它克隆细胞作为阴性对照。

Q:如何确定MHC四聚体试剂稀释比例?

A在进行大规模试验前,建议先进行预试验,以确定最佳的MHC四聚体稀释比例。通常,建议MHC四聚体的初始稀释比例为1:1001:200。请根据具体实验,优化其稀释比例,以期获得最佳的染色效果。


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