nKRAS背景及致瘤原理
RAS是一种具有GTP酶活性的G蛋白，其基因是肿瘤中*常见的突变基因之一，30%的肿瘤携带RAS变异，算上RAS调控因子和信号通路上下游的变异，几乎覆盖所有肿瘤，被誉为肿瘤基因之王。KRAS是RAS家族中*常出现的亚型，其基因突变占RAS基因突变总数的85%。随着KRAS
G12C小分子抑制剂AMG510（Amgen，1/2期临床）、MRTX849（MiratiTherapeutics，1/2期临床）、BI-2852（BoehringerIngelheim，临床前研究）药物的研发及其相关抗癌数据的公布，使得KRAS成为当前抗癌药物研究的热点。
Reference: Liu P.Y., Wang Y.J., Li X. Targeting
the Untargetable KRAS in Cancer Therapy. Acta Pharmaceutica Sinica B., 2019
9(5):871-879.
nKRAS常见突变靶点
KRAS突变主要发生在12、13、61、117和146密码子，这些突变位点破坏了KRAS-GTP和KRAS-GDP水解和交换的稳态平衡，导致KRAS持续处于KRAS-GTP状态。在胰腺导管腺癌（PDAC）、结直肠癌（CRC）和非小细胞肺癌（NSCLC）中，12位密码子突变占主导地位，占所有KRAS突变的90%。
Reference：Waters A.M.
& Der C.J. KRAS: the Critical Driver and Therapeutic Target for
Pancreatic Cancer. Cold Spring Harb Perspect Med 2018; 8:
a031435
对12位密码子突变分析发现，在NSCLC中，
G12C和G12V为*常见的突变；在PDAC中，G12D、G12V、G12R为*常见突变；在CRC中，G12D、G12V、G12C为*常见突变。
nKRAS
G12D抗原肽特异性CD8+T可有效靶向并杀伤结直肠癌细胞
Tran er al.
2016从HLA-C*0802转移性结直肠癌患者肿瘤浸润性淋巴细胞中筛选并体外扩培靶向KRAS
G12D的CD8+T细胞，将扩培的特异性CD8+T细胞对患者进行回输，在6周和9个月分别进行评估，发现转移灶1、2、4均出现消退，转移灶3在9个月出现反复与肿瘤细胞中HLA-C*0802分子缺失有关。
结论：回输靶向KRAS
G12D特异性CD8+T细胞，是一种有效的肿瘤免疫疗法。
Reference：Tran E.,
Robbins P.F., Lu Y.C., Prickett T.D., Gartner J.J., Jia L., Pasetto A., et
al. T-Cell Transfer Therapy Targeting Mutant KRAS in Cancer. N Engl J Med.
2016; 375(23): 2255–2262.
nTCR-T细胞可靶向KRAS突变的肿瘤细胞
Wang et
al., 2016在KRAS突变体免疫的HLA-A*1101转基因小鼠中分离到对KRAS
G12V及G12D具有高反应性的TCR，转导TCR的PBMC细胞可识别多个KRAS突变的HLA-A*1101肿瘤细胞系；此外，在黑色素瘤、胰腺癌等小鼠模型中进一步验证了KRAS突变体特异性TCR-T细胞具有显著的抗肿瘤效果。
Reference：Wang Q.J.,
Yu Z.Y., Griffith K., Hanada K., Restifo N.P., Yang J.C. Identification of
T-cell Receptors Targeting KRAS-mutated Human Tumors. Cancer Immunol Res.
2016 March ; 4(3): 204–214
nKRAS
MHC-I Tetramer
结合KRAS表位肽研究*新成果【6,
7】，采用*新的抗原表位肽预测算法，针对KRAS常见的突变位点：G12D、G12V、G12C、G12R、G13D，结合中国人群高频HLA-A*1101，设计生产了相应的KRAS
MHC-I Tetramer，旨在助力KRAS疫苗、TCR-T等免疫治疗产品研发及治疗后临床疗效评估。
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抗原突变位点
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MHC分型
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多肽序列
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位置
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KRAS-G12D
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A*1101
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VVVGADGVGK
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7~16
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A*1101
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VVGADGVGK
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8~16
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KRAS-G12V
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A*1101
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VVVGAVGVGK
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7~16
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A*1101
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VVGAVGVGK
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8~16
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KRAS-G12C
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A*1101
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VVGACGVGK
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8~16
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A*1101
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VVVGACGVGK
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7~16
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KRAS-G12R
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A*1101
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VVGARGVGK
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7~16
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A*1101
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VVVGARGVGK
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8~16
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KRAS-G13D
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A*1101
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VVVGAGDVGK
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7~16
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A*1101
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VVGAGDVGK
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8~16
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