由于TCR与 MHC-抗原肽复合物之间的亲和力低，半衰期短，相互结合后容易快速脱落，重组的可溶性MHC-抗原肽复合物单体并不适合用于抗原特异性的T细胞检测。MHC四聚体技术（MHC Tetramer
Technology）提供了一种快速、简便的检测抗原特异性T细胞（antigen-specific
T cells）的方法，MHC四聚体分两类：MHC-I四聚体和MHC-II四聚体。
MHC-Ⅰ类四聚体
纯化获得的重组人MHC（重链）和人β2微球蛋白（β2m）与过量的8～10个氨基酸组成的肽段（特异性抗原）一起孵育，共复性，折叠形成MHC-抗原肽单体，并经高效液相质谱（HPLC）纯化。纯化后的MHC-抗原肽单体通过BirA酶（生物素连接酶）催化在其MHC重链C-端共价结合上一个生物素（Biotin）分子，即MHC-抗原肽-生物素单体，再经过链霉亲和素-琼脂糖亲和层析柱（Sreptavidin–agarose
Afinity Clumn Cromatography）纯化，*后与已标记有荧光染料（FITC，PE或者APC）的链霉亲和素结合，因为一分子链霉亲和素正好与四分子生物素相结合，故形成（MHC-抗原肽-生物素）4-链霉亲和素聚合物，即抗原特异性的MHC-Ⅰ四聚体。
MHC-Ⅱ类四聚体
MHCⅡ类分子是由α链和β链以非共价键形成的异二聚体。与I类分子不同，两条链均具多态性，因此，在体外构建可溶性MHCⅡ类分子四聚体要复杂的多。多数MHCⅡ类分子四聚体采用由昆虫细胞表达的重组蛋白所构建。首先在其α、β链的C端分别加上酸性和碱性亮氨酸拉链基序，且C端与亮氨酸拉链之间有15个氨基酸残基的连接蛋白；β链上还要通过7个氨基酸残基的间隔加上可生物素化的底物肽（BSP）。经大量表达、分离纯化和生物素化后，在体外酸性条件下与特异性抗原肽形成MHCⅡ-肽复合物，*后与荧光素（PE）标记的链霉亲和素混合形成四聚体。
MHC四聚体制备（以MHC-I四聚体为例）
纯化获得的重组人MHC（重链）和人β2微球蛋白（β2m）与过量的8～10个氨基酸组成的肽段（特异性抗原）一起孵育，共复性，折叠形成MHC-抗原肽单体，并经高效液相质谱（HPLC）纯化。纯化后的MHC-抗原肽单体通过BirA酶（生物素连接酶）催化在其MHC重链C-端共价结合上一个生物素（Biotin）分子，即MHC-抗原肽-生物素单体，再经过链霉亲和素-琼脂糖亲和层析柱（Sreptavidin–agarose
Afinity Clumn Cromatography）纯化，*后与已标记有荧光染料（FITC，PE或者APC）的链霉亲和素结合，因为一分子链霉亲和素正好与四分子生物素相结合，故形成（MHC-抗原肽-生物素）4-链霉亲和素聚合物，即抗原特异性的MHC-I四聚体。
